Modelo de trombosis de derivación arteriovenosa de NHP en monos cynomolgus para la evaluación traslacional de fármacos antitrombóticos

Los trastornos trombóticos siguen siendo una de las principales causas de morbilidad y mortalidad en todo el mundo, lo que impulsa la innovación continua en el desarrollo de fármacos anticoagulantes y antitrombóticos. Si bien los anticoagulantes tradicionales, como las heparinas y los anticoagulantes orales directos (ACOD), han mejorado significativamente el tratamiento clínico, la posibilidad de sufrir hemorragias sigue siendo una limitación importante que limita las ventanas terapéuticas y la seguridad a largo plazo-.

En los últimos años, los objetivos emergentes dentro de la vía intrínseca de la coagulación -, en particular el factor XI de la coagulación (FXI) y el FXIa -, han atraído una atención sustancial como posibles estrategias antitrombóticas de próxima-generación. Estos enfoques tienen como objetivo lograr una inhibición eficaz de la trombosis y al mismo tiempo minimizar el riesgo de hemorragia, un objetivo a menudo denominado "desacoplar la trombosis de la hemostasia".

Sin embargo, la evaluación traslacional de nuevos anticoagulantes sigue siendo un desafío. Los modelos de trombosis de roedores con frecuencia no logran recapitular completamente la fisiología de la coagulación humana, la biología de las plaquetas, las respuestas vasculares y las características farmacodinámicas. En consecuencia, los modelos de trombosis de primates no-humanos (NHP) se reconocen cada vez más como plataformas traslacionales críticas para evaluar la eficacia antitrombótica, los biomarcadores de coagulación y la probabilidad de hemorragia antes del desarrollo clínico.

Aprovechando su especializaciónplataforma de hematología y farmacología cardiovascular, Prisys Biotechnologies ha establecido un sistema altamente estandarizadoModelo de trombosis de derivación arteriovenosa (AV) femoral de mono cynomolgusdiseñado para la evaluación traslacional de anticoagulantes, productos biológicos y nuevos moduladores de la vía de la coagulación. La plataforma integra experiencia quirúrgica, evaluación cuantitativa de trombos, análisis de biomarcadores de coagulación y evaluación del riesgo de hemorragia dentro de un sistema NHP clínicamente relevante.

El sistema de coagulación representa una interacción altamente coordinada entre el endotelio vascular, las plaquetas circulantes, los factores de coagulación, los mediadores inflamatorios y la dinámica del flujo sanguíneo. Pequeñas diferencias en estas vías pueden afectar sustancialmente la previsibilidad traslacional durante el desarrollo de fármacos.

Aunque los modelos de trombosis en roedores proporcionan información mecanística útil, varias limitaciones reducen su valor predictivo para el desarrollo clínico de anticoagulantes:

• Diferencias significativas entre especies.en la expresión y actividad del factor de coagulación

• Diferencias en la reactividad plaquetaria.y generación de trombina

• Comparabilidad limitadade biomarcadores farmacodinámicos

• Valor predictivo reducidopara la evaluación del riesgo de hemorragia

• Incapacidad para reproducirse completamente.procedimientos de intervención vascular humana

Estas limitaciones se vuelven particularmente importantes para las clases terapéuticas emergentes, como los inhibidores del FXI, los anticuerpos biespecíficos, las terapias de ARN y los enfoques-de edición genética dirigidos a las vías de coagulación.

Los primates no-humanos ofrecen una relevancia traslacional sustancialmente mejorada debido a su mayor homología con los humanos en fisiología de la coagulación, parámetros hematológicos, anatomía vascular y metabolismo de los fármacos. Por lo tanto, los monos Cynomolgus se utilizan cada vez más en programas avanzados de investigación sobre trombosis y hemostasia.

El modelo de trombosis de la derivación AV es una plataforma-de trombosis traslacional bien establecida y diseñada para evaluar cuantitativamente la formación de trombos en condiciones de flujo sanguíneo controlado. En Prisys Biotechnologies, el modelo se ha optimizado para lograr reproducibilidad, consistencia quirúrgica y sensibilidad de criterio de valoración cuantitativa en monos cynomolgus.

Bajo anestesia profunda y condiciones quirúrgicas estériles, la arteria femoral y la vena femoral se aíslan quirúrgicamente aproximadamente 3 cm por debajo de la región inguinal. Luego se inserta secuencialmente un sistema de catéter de derivación AV especialmente diseñado que contiene un alambre trombogénico en forma de U-en los vasos venosos y arteriales. El alambre trombogénico actúa como una superficie controlada para la generación de trombos durante la circulación sanguínea a través del sistema de derivación extracorpórea.

Después de la colocación del catéter, se liberan las pinzas arteriales para iniciar la circulación sanguínea continua a través del circuito de derivación AV. El tiempo de circulación se controla con precisión para garantizar condiciones estandarizadas de formación de trombos en todos los grupos experimentales. Dado que la generación de trombos se produce en condiciones dinámicas de flujo sanguíneo, el modelo imita fielmente los procesos trombogénicos clínicamente relevantes que implican la activación plaquetaria, el inicio de la cascada de coagulación y la formación de fibrina. En comparación con los ensayos de coagulación estática, este sistema de circulación dinámica proporciona una relevancia traslacional sustancialmente mayor para evaluar terapias antitrombóticas.

Al finalizar el período de circulación, el alambre trombogénico en forma de U-y el trombo adherido se retiran cuidadosamente del sistema de catéter. Después de un suave lavado con solución salina para eliminar el exceso de líquido, el alambre-que contiene el trombo se pesa utilizando una balanza analítica de alta-precisión. Luego se calcula el peso neto del trombo restando el peso inicial del alambre del peso total medido. Este criterio de valoración cuantitativo del peso neto del trombo proporciona una alta sensibilidad del ensayo, una fuerte reproducibilidad, capacidad de evaluación de dosis-respuesta y evaluación farmacodinámica directa de la eficacia antitrombótica.

• Biología de la coagulación humana más cercana:Los monos Cynomolgus exhiben perfiles de factores de coagulación y respuestas plaquetarias muy comparables a los de los humanos.
• Evaluación de biomarcadores clínicamente relevantes:El modelo admite el análisis integrado de biomarcadores de coagulación, incluidos aPTT, PT y marcadores de generación de trombina.
• Condiciones hemodinámicas dinámicas:A diferencia de los ensayos de coagulación in vitro simplificados, el sistema de derivación AV reproduce la formación de trombos bajo un flujo sanguíneo continuo.

• Evaluación farmacodinámica longitudinal:El modelo no es-terminal y es mínimamente invasivo, lo que permite realizar mediciones repetidas.

Prisys Biotechnologies soporta una amplia gama deinvestigación de enfermedades de sangrado y coagulación. Sus servicios integrados incluyenServicios de evaluación PK/PDy avanzadoplataforma de imágenes clínicasintegración. A medida que el campo avanza hacia la anticoagulación de precisión y la modulación selectiva de la coagulación-, las plataformas avanzadas de trombosis NHP siguen siendo esenciales para validar las estrategias terapéuticas de próxima-generación antes de su traducción clínica.

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